一种定向敲降斑马鱼基因组中多拷贝基因的方法
01
一种定向敲降斑马鱼基因组中
多拷贝基因的方法
知识产权获得类型
发明专利
专利介绍
本项目发展了一种定向敲降斑马鱼基因组中多拷贝基因的方法，包括以下步骤：
步骤一：斑马鱼胚胎的制备；
步骤二：dCas9-Eve融合蛋白的表达载体构建；
步骤三：进行sgRNA、dCas9-Eve、Cas9和基因的体外转录，再将体外转录合成的sgRNA、dCas9-Eve、Cas9mRNA和基因 mRNA用RNeasy Mini Kit进行纯化；
步骤四：sgRNA的活性鉴定；
步骤五：dCas9-Eve法敲降多拷贝基因znfl1s的表达，用胚胎整体原位杂交法通过检测基因的表达，判定基因表达被敲降的情况。
背景技术
作为优选的模式脊椎动物，斑马鱼模型可以用来评价人类基因的作用与功能、解析其在遗传与发育上发挥作用的分子机制。
在我国，现有300个以上的实验室利用斑马鱼开展有关科研工作。
创新价值
本发明利用dCas9-Eve的方法，在有效靶向识别基因启动子的sgRNA存在的情况下，可特异敲降基因的转录，避免了在研究基因在胚胎早期发育中受MO毒性或者脱靶导致的非特异性表型的影响，而且Eve抑制转录结构域是斑马鱼来源的，因此dCas9-Eve可以适用于对任何斑马鱼基因在转录水平的敲降。
市场需求
通过基因组改造（基因敲除、敲入和转基因等）构建人类疾病的斑马鱼模型，表型模拟人类疾病的病症，进而用于研究分子遗传病的病理机制、筛选治疗疾病的化学药、开发基因治疗的生物药等生物医药的研发。
项目目标
合作转化
转让方式
面议
关于萃智
南京萃智医疗科技有限公司成立于2018年底，目前已与南京市转化医学研究院、上海交大医学院虹桥国际医学研究院、浙江清华长三院等机构紧密合作，在医疗科技成果转移转化、医疗创新能力提升培训、医疗知识产权咨询评估/挖掘/加固、医疗样品试制推广、医学创新活动筹办等方面具备丰富的实战经验。作为南京市转化医学研究院的技术经理人服务机构，萃智医疗已帮助省、市多家公立医疗机构成功落地转化了多项医疗科技成果。
关于转化院
南京市转化医学研究院是面向南京市医疗卫生领域开展医学科技成果转化的服务平台，2019年4月经南京市卫健委批复，依托南京鼓楼医院运行。转化院的目标是以临床重大健康需求为导向，以核心技术突破为驱动，以重大产品研发、产业化和医疗服务市场化发展为重点，推动医院与政府、科研院所、企业、社会资本等协同创新，形成创新链、产业链及资本链紧密结合的科技成果转移转化体系，促进国内医学研究和生物医药产业深度融合，最终建成国内一流的转化医学创新基地，助力南京市生物医药产业的高质量发展。
欢迎扫码咨询
谷老师 15950501337
胡老师 13770626996 （特邀转化顾问）
材料整理：萃智医疗，南京市转化医学研究院
编辑：王登登
校对：谷娴
